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食用菌滅菌鍋爐下列各法可根據實驗室具體條件與需要選做。

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食用菌滅菌鍋爐下列各法可根據實驗室具體條件與需要選做。

發布日期:2017-07-26 00:00 來源:http://escortluton.com 點擊:

1.食用菌滅菌鍋爐斜面低溫保藏法

凤凰彩票网將菌種接種在適宜的固體斜面培養基上,待菌充分生長后,棉塞部分用油紙包扎好,移至2—8℃的冰箱中保藏。

凤凰彩票网保藏時間依微生物的種類而有不同,霉菌、放線菌及有芽孢的細菌保存2—4個月,移種一次。酵母菌兩個月,細菌最好每月移種一次。

此法為實驗室和工廠菌種室常用的保藏法,優點是操作簡單,使用方便,不需特殊設備,能隨時檢查所保藏的菌株是否死亡、變異與污染雜菌等。缺點是容易變異,因為培養基的物理、化學特性不是嚴格恒定的,屢次傳代會使微生物的代謝改變,而影響微生物的性狀;污染雜菌的機會亦較多。

 2.液體石蠟保藏法

(1)將液體石蠟分裝于三角燒瓶內,塞上棉塞,并用牛皮紙包扎,1.05kg/cm2>,121.3℃滅菌30分鐘,然后放在40℃溫箱中,使水汽蒸發掉,備用。

(2)將需要保藏的菌種,在最適宜的斜面培養基中培養,使得到健壯的菌體或孢子。

(3)用滅菌吸管吸取滅菌的液體石蠟,注入已長好菌的斜面上,其用量以高出斜面頂端1cm為準(圖Ⅶ-12),使菌種與空氣隔絕。

凤凰彩票网(4)將試管直立,置低溫或室溫下保存(有的微生物在室溫下比冰箱中保存的時間還要長)。

食用菌滅菌鍋爐

此法實用而效果好。霉菌、放線菌、芽孢細菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1—2年,一般無芽孢細菌也可保藏1年左右,甚至用一般方法很難保藏的腦膜炎球菌,在37℃溫箱內,亦可保藏3個月之久。此法的優點是制作簡單,不需特殊設備,且不需經常移種。缺點是保存時必須直立放置,所占位置較大,同時也不便攜帶。從液體石蠟下面取培養物移種后,接種環在火焰上燒灼時,培養物容易與殘留的液體石蠟一起飛濺,應特別注意。

3.濾紙保藏法

(1)將濾紙剪成0.5×1.2cm的小條,裝入0.6×8cm的安瓿管中,每管1—2張,塞以棉塞,1.05kg/cm2>,121.3℃滅菌30分鐘。

凤凰彩票网(2)將需要保存的菌種,在適宜的斜面培養基上培養,使充分生長。

凤凰彩票网(3)取滅菌脫脂牛乳1—2ml滴加在滅菌培養皿或試管內,取數環菌苔在牛乳內混勻,制成濃懸液。

(4)用滅菌鑷子自安瓿管取濾紙條浸入菌懸液內,使其吸飽,再放回至安瓿管中,塞上棉塞。

(5)將安瓿管放入內有五氧化二磷作吸水劑的干燥器中,用真空泵抽氣至干。

(6)將棉花塞入管內,用火焰按圖Ⅶ-13熔封,保存于低溫下。

(7)需要使用菌種,復活培養時,可將安瓿管口在火焰上燒熱,滴一滴冷水在燒熱的部位,使玻璃破裂,再用鑷子敲掉口端的玻璃,待安瓿管開啟后,取出濾紙,放入液體培養基內,置溫箱中培養。

凤凰彩票网細菌、酵母菌、絲狀真菌均可用此法保藏,前兩者可保藏2年左右,有些絲狀真菌甚至可保藏14—17年之久。此法較液氮、冷凍干燥法簡便,不需要特殊設備。

4.沙土保藏法

凤凰彩票网(1)取河沙加入10%稀鹽酸,加熱煮沸30分鐘,以去除其中的有機質。

(2)倒去酸水,用自來水沖洗至中性。

(3)烘干,用40目篩子過篩,以去掉粗顆粒,備用。

(4)另取非耕作層的不含腐植質的瘦黃土或紅土,加自來水浸泡洗滌數次,直至中性。

凤凰彩票网(5)烘干,碾碎,通過100目篩子過篩,以去除粗顆粒。

(6)按一份黃土、三份沙的比例(或根據需要而用其他比例,甚至可全部用沙或全部用土)摻合均勻,裝入10×100mm的小試管或安瓿管中,每管裝1g左右,塞上棉塞,進行滅菌,烘干。

(7)抽樣進行無菌檢查,每10支沙土管抽一支,將沙土倒入肉湯培養基中,37℃培養48小時,若仍有雜菌,則需全部重新滅菌,再作無菌試驗,直至證明無菌,方可備用。

凤凰彩票网(8)選擇培養成熟的(一般指孢子層生長豐滿的,營養細胞用此法效果不好)優良菌種,以無菌水洗下,制成孢子懸液。

(9)于每支沙土管中加入約0.5ml(一般以剛剛使沙土潤濕為宜)孢子懸液,以接種針拌勻。

(10)放入真空干燥器內,用真空泵抽干水分,抽干時間越短越好,務使在12小時內抽干。

凤凰彩票网(11)每10支抽取一支,用接種環取出少數沙粒,接種于斜面培養基上,進行培養,觀察生長情況和有無雜菌生長,如出現雜菌或菌落數很少或根本不長,則說明制作的沙土管有問題,尚須進一步抽樣檢查。

(12)若經檢查沒有問題,用火焰熔封管口,放冰箱或室內干燥處保存。每半年檢查一次活力和雜菌情況。

(13)需要使用菌種,復活培養時,取沙土少許移入液體培養基內,置溫箱中培養。

凤凰彩票网此法多用于能產生孢子的微生物如霉菌、放線菌,因此在抗生素工業生產中應用最廣,效果亦好,可保存2年左右,但應用于營養細胞效果不佳。


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